人促红细胞生成素基因和GFP共表达的输卵管特异性表达载体的构建

作者：喻小亮; 胡雄贵; 谢达平; P Trefil; 邓缘; 燕海峰

来源：现代生物医学进展, 2009, (13): 2460-2464.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2009.13.012

• 卵清蛋白
• 促红细胞生成素
• 共表达
• 生物反应器 Ovalbumin
• Erythropoietin
• Co-express
• Bioreactor

本实验从蛋鸡输卵管基因组DNA中扩增出约1.3kb的卵清蛋白5'端调控区(OV),并从质粒扩增出人促红细胞生成素(hEPO)基因组DNA。将hEPO亚克隆入pEGFP-C1载体的多克隆位点,命名为pEGFP-hEPO,然后将OV片段亚克隆入经Ase I和Vsp I双酶切的切口处,替换掉CMV启动子,经测序和酶切鉴定正确,成功构建了鸡卵清蛋白5'端调控区调控人促红细胞生成素的共表达载体pOV-GFP-hEPO。并利用脂质体转染法转染鸡输卵管上皮细胞,用荧光倒置显微镜观测绿色荧光蛋白的表达,结果显示共表达载体pOV-GFP-hEPO能够在鸡输卵管上皮细胞定位表达。为制备生产人促红细胞生成素的鸡输卵...

• 单位
  湖南农业大学; 湖南省畜牧兽医研究所