摘要
目的探讨脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PRELP1)对甲状腺癌细胞增殖和周期的影响及其机制。方法采用蛋白质印迹法(Western blot)分析人甲状腺正常细胞系NTHY-ORI 3-1、甲状腺癌细胞CAL-62细胞和SW579细胞PRELP蛋白表达水平;采用对照组和PRELP1过表达慢病毒感染甲状腺癌细胞CAL-62细胞, 建立对照组和PRELP1组细胞。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和体外移植瘤实验分析两组细胞的增殖情况;采用流式细胞数分析两组细胞周期和凋亡变化;采用Western blot分析增殖、周期和凋亡相关蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果甲状腺癌细胞CAL-62细胞和SW579细胞PELP1蛋白表达水平(1.72±0.12、2.24±0.22)明显高于人甲状腺正常细胞系NTHY-ORI 3-1(1.10±0.16), 差异有统计学意义(t=7.628、10.390, P<0.05)。对照组细胞48 h吸光度值(1.91±0.05)明显高于PRELP1 KD组(1.22±0.06), 差异有统计学意义(t=20.660, P<0.05)。对照组细胞克隆形成数量[(122.17±17.32)个]明显高于PRELP1 KD组[(91.17±10.14)个], 差异有统计学意义(t=13.124, P<0.05)。对照组细胞肿瘤体积[(769.33±69.48) mm3]明显高于PRELP1 KD组[(511.17±35.97) mm3], 差异有统计学意义(t=8.082, P<0.05)。对照组细胞G0/G1期比例[(35.36±2.02)%]明显低于PRELP1 KD组[(41.14±1.96)%], 差异有统计学意义(t=5.019, P<0.05)。对照组细胞S期比例[(31.53±1.59)%]明显低于PRELP1 KD组[(25.81±1.53)%], 差异有统计学意义(t=6.328, P<0.05)。对照组细胞G2期比例[(27.91±1.66)%]低于PRELP1 KD组[(23.09±1.72)%], 差异有统计学意义(t=4.939, P<0.05)。对照组细胞凋亡比例[(5.75±1.25)%]明显低于PRELP1 KD[(28.67±3.23)%], 差异有统计学意义(t=16.180, P<0.05)。对照组细胞细胞核增殖抗原(Ki-67)蛋白和Cyclin D1蛋白表达水平(1.20±0.10、1.24±0.07)明显高于PRELP1 KD组(0.71±0.04、0.75±0.06), 差异有统计学意义(t=10.700、12.420, P<0.05)。对照组细胞Caspase-3蛋白(0.90±0.03)明显低于PRELP1 KD组(1.31±0.07), 差异有统计学意义(t=13.070, P<0.05)。结论 PRELP1在甲状腺癌细胞中呈低表达, 并参与了甲状腺癌细胞的增殖、周期和凋亡的发生过程。
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单位新乡医学院第一附属医院