水稻胞质不育相关蛋白ORF290及互作蛋白对酵母生长的影响

作者：夏栋; 谭艳平; 刘学群; 刘新琼; 李开; 王春台^*

来源：分子植物育种, 2023, 21(09): 2933-2940.

DOI：10.13271/j.mpb.021.002933

• 细胞质雄性不育
• 线粒体
• orf290
• 互作蛋白
• 酵母生长

orf290是本实验室从红莲型水稻细胞质雄性不育品种‘粤泰A’(YTA)中克隆的一个与雄性不育相关的线粒体基因，前期通过膜蛋白酵母双杂交获得了2个与ORF290互作的蛋白APX8和E37。为探讨ORF290与APX8和E37发生相互作用时对酿酒酵母NMY51生长的影响，本实验利用膜蛋白酵母双杂交DUAL membrane系统，分别将诱饵蛋白和互作蛋白基因构建到pBT3-SUC-和pPR3-N-载体上，获得pBT3-SUC-orf290、pPR3-N-APX8和p PR3-N-E37质粒，然后分别单转和共转(pBT3-SUC-orf290与pPR3-N-APX8, pBT3-SUCorf290与pPR3-N-E37)酵母NMY51菌株。在RNA和蛋白水平分别证实相关基因在转化酵母中高效表达，并且相关蛋白以膜蛋白的形式存在。含不同质粒酵母生长曲线测定结果表明，宿主菌NMY51、单独转化pBT3-SUC-orf290、p PR3-N-APX8和pPR3-N-E37的NMY51酵母生长曲线相近，体内ATP含量无明显差异，而共表达ORF290与APX8或E37的酵母菌株的生长明显低于对照组，ATP含量也明显降低。这表明ORF290与APX8或E37互作后通过降低体内ATP水平导致酵母生长受到抑制。

• 单位
  生命科学学院; 中南民族大学