应用real-time PCR测定幼兔肠道内双歧杆菌和乳杆菌的变化

作者：陈津津; 蔡威

来源：世界华人消化杂志, 2007, (31): 3278-3283.

DOI：10.3969/j.issn.1009-3079.2007.31.006

• 双歧杆菌
• 乳杆菌
• 实时荧光定量PCR技术
• 肠外营养 Bifidobacteria
• Lactobacilli
• Real-time PCR
• Parenteral nutrition

目的:通过研究PN过程中肠道双歧杆菌和乳杆菌的变化,探讨PN导致肠屏障功能障碍的机制.方法:将新西兰种白兔16只,分成对照组(正常兔食饲养)和PN组(幼兔完全肠外营养).10 d后自直肠取出新鲜粪便,抽提所有细菌DNA,常规PCR检测合成的双歧杆菌和乳杆菌属引物的特异性.应用青春双歧杆菌和植物乳杆菌作外标准品,梯度稀释制作标准曲线,作灵敏度测定.应用SYBR Green I Real-time PCR法,定量检测粪便中双歧杆菌和乳杆菌含量.结果:琼脂糖凝胶电泳显示两种引物特异性良好,灵敏度达到10~2个菌.溶解曲线显示单一峰形,说明没有引物二聚体形成.粪便细菌定量结果显示,PN组幼兔湿粪(0....

• 单位
  上海交通大学医学院附属新华医院