摘要
目的检测并分析神经元正五聚体蛋白2(neuronal pentraxin 2,NPTX2)基因在透明细胞性肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达情况及其临床意义。方法运用q PCR、western blot或免疫组织化学法分别从mRNA水平和蛋白质水平上对ccRCC细胞系和组织中NPTX2基因的表达情况进行检测。对体外培养细胞系(人肾小管正常上皮细胞系HK-2、人肾透明细胞癌原发灶细胞系786-O和胸水转移灶细胞系ACHN):采用q PCR和western blot法检测NPTX2在细胞系中的mRNA及蛋白的表达情况,并分析其在正常与癌细胞系中的表达差异。对组织标本:(1)c DNA芯片(15例ccRCC癌及对应癌旁正常组织):采用q PCR法检测并分析NPTX2 mRNA在两者中的表达情况及差异;(2)新鲜组织(4例ccRCC癌及对应癌旁正常组织):采用western blot法检测并分析NPTX2蛋白在两者中的表达情况及差异;(3)组织蜡块(70例ccRCC癌及对应癌旁正常组织):采用免疫组化En Vision法进一步验证NPTX2蛋白在两者中的表达情况及差异,并分析NPTX2蛋白表达与ccRCC患者的重要临床参数及预后之间的关系。结果在ccRCC细胞系及癌组织中,NPTX2的mRNA水平和蛋白质水平均明显高于正常细胞系及癌旁正常组织,其差异有统计学意义(P<0. 05)。NPTX2蛋白表达水平与ccRCC肿瘤WHO/ISUP病理分级相关(P<0. 05),与患者的性别、年龄、TNM分期和肿瘤大小尚不能认为相关(P>0. 05)。Kaplan-Meier单因素分析及log-rank检验显示NPTX2蛋白表达水平高低与患者的生存相关(P=0. 04):高表达组患者同期生存率低于低表达组,预后较差。结论 NPTX2在ccRCC癌组织中异常高表达,与ccRCC肿瘤WHO/ISUP病理分级及患者的预后相关,可作为潜在的ccRCC诊断及判断预后的生物标志物。
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单位基础医学院; 成都市第三人民医院; 成都中医药大学