摘要
目的探讨微纤丝相关蛋白4(MFAP4)对肾透明细胞癌(ccRCC)的作用及其机制。方法 2020年6月至2020年12月武汉大学人民医院泌尿外科收集的30对肾癌组织及细胞标本, 通过实时定量免疫荧光PCR和免疫印迹方法检测MFAP4蛋白表达量;利用腺病毒构建过表达MFAP4稳转肿瘤细胞株, 通过细胞迁移和侵袭实验检测MFAP4对ccRCC细胞株的影响, 利用免疫荧光和免疫印迹技术检测MFAP4对ccRCC的作用机制。多组间比较采用单因素方差分析, 两两比较采用t检验。结果在肾癌组织样本和肾肿瘤细胞株中MFAP4的转录水平(转录表达值:5.22±2.61比32.08±7.12, t=17.68, P<0.05)和蛋白水平表达量(条带相对灰度值:1.00±0.01比2.30±0.25, t=9.18, P<0.05)显著高于正常组。同时, MFAP4过表达组ccRCC侵袭细胞数量显著高于转染对照组(细胞数:907±63比1 997±101, t=12.87, P<0.05;1 208±98比2 364±121, t=15.87, P<0.05), 免疫荧光和免疫印迹结果提示, 过表达MFAP4降低LC3B表达量(条带相对灰度值:1.00±0.01比0.65±0.08, t=46.42, P<0.05;1.00±0.01比0.67±0.06, t=26.46, P<0.05), 促进p62表达(条带相对灰度值:1.00±0.01比2.27±0.04, t=7.93, P<0.05;1.00±0.01比2.17±0.08, t=9.15, P<0.05)。结论 MFAP4可能通过抑制细胞自噬促进肾癌进展。
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单位武汉大学人民医院