中成药DNA提取技术优化及其在人参类制剂分子鉴定中的应用

作者：程春松; 谭天琪; 龙泽; 刘智祖; 吴文如; 王英平; 刘良; 周华

来源：中草药, 2015, 46(17): 2549-2555.

DOI：10.7501/j.issn.0253-2670.2015.17.008

• 中成药
• DNA
• 分子鉴定
• 人参类制剂
• CTAB法
• 淀粉
• 蔗糖
• 葡萄糖

目的建立并完善从中成药及保健品中提取DNA的有效方法,并在人参类制剂中进行验证。方法使用中成药和保健品中常用的辅料(如淀粉、蔗糖、葡萄糖等)模拟CTAB法提取DNA过程,用以筛选影响提取DNA效率的因素;使用甲醇作为沉淀试剂优化传统的CTAB法,并使用MAS-PCR方法对市场上人参类中成药及保健品进行分子鉴定,以验证优化的技术。结果中成药及保健品中的淀粉(包括药源性淀粉和辅料添加的淀粉)通过CTAB反应后生成极性较大的复合物,其与70%乙醇不能互溶,而且在碱性条件下对DNA有强烈的溶解作用,从而影响了CTAB法提取DNA的提取效率;利用甲醇作为沉淀试剂能够有效去除CTAB裂解过程中产生的高极性复合物的影响,70%甲醇-醋酸钠溶液能够有效提取中成药及保健品的DNA;利用优化的DNA提取方法和MAS-PCR法实现了11种市售人参类制剂的快速分子鉴定,结果显示8种与商品描述一致、1种有掺伪情况、2种为伪品。结论使用甲醇作为沉淀试剂优化传统的CTAB法,可以较好地克服中药制剂中淀粉对DNA提取的不利影响,可以有效地实现基于DNA的中药制剂分子鉴定。

• 单位
  广州中医药大学; 中国农业科学院特产研究所; 医药学院