摘要
目的:探讨鼠源M2型巨噬细胞对食管鳞状细胞癌KYSE30细胞克隆、侵袭、迁移及上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达的影响。方法:将鼠源巨噬细胞RAW264.7分为诱导组和空白对照组。诱导组细胞以含0.02 mg/L IL-4和IL-13的DMEM培养基培养;空白对照组以DMEM培养基培养。细胞培养48 h后,采用流式细胞术检测CD206+F4/80+细胞百分比;qRT-PCR检测CD206、Mgl-2、Clec10a mRNA的表达情况;Western blot检测CD206蛋白的表达。将KYSE30细胞分为对照组(仅培养)和共培养组。共培养组KYSE30细胞与鼠源M2型巨噬细胞共培养。采用平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-9蛋白的表达;Transwell及划痕实验检测细胞侵袭和迁移情况。结果:与空白对照组相比,诱导组中RAW264.7细胞的CD206+F4/80+细胞百分比增加,CD206、Mgl-2、Clec10a mRNA和CD206蛋白的表达上调(P均<0.05)。与对照组相比,共培养组细胞的克隆形成能力增强(P<0.001),E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-9蛋白的表达均上调(P<0.05),侵袭和迁移能力均增强(P<0.001)。结论:诱导后的鼠源M2型巨噬细胞能够增强KYSE30细胞的克隆形成能力、侵袭和迁移能力及EMT相关蛋白的表达。
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单位郑州大学; 基础医学院