原花青素对LPS/ATP诱导的NLRP3炎症小体激活及NF-κBp65磷酸化的抑制作用

作者：卢晓星; 张小强^*; 苗歆雨; 季倩倩; 李琪; 陶一凡

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2020, 40(08): 1111-1118.

• 原花青素
• 炎症因子
• NLRP3炎症小体
• 脂多糖
• 腺嘌呤核苷三磷酸

目的:研究原花青素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)与腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)联合诱导的小鼠小胶质细胞BV2 NOD样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体激活及核因子(nuclear factor,NF)-κBp65磷酸化的抑制作用。方法:以1.0μg/mL LPS、2.5μmol/L ATP诱导BV2细胞炎症损伤模型,用不同浓度原花青素(0.1、1.0、2.5、5.0μg/mL)干预细胞。采用噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法检测细胞存活率;比色法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)释放水平;微量酶标法测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力;ELISA法检测白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-18的分泌水平;Western blot法检测NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-1、pro-caspase-1、p-NF-κBp65、NF-κBp65蛋白表达水平。结果:不同浓度的原花青素对BV2细胞存活率的影响与对照组相比差异无统计学意义(P> 0.05)。与对照组相比,LPS/ATP诱导可增加BV2细胞NO、IL-1β、IL-18水平以及LDH活力(P <0.05),增加NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1、p-NF-κBp65蛋白表达水平(P <0.05)。与LPS/ATP组相比,原花青素能降低BV2细胞NO、IL-1β、IL-18水平以及LDH活力(P <0.05);原花青素(1.0、2.5、5.0μg/mL)降低NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1蛋白表达水平(P <0.05);NF-κB抑制剂BAY11-7082(5.0μmol/L)降低NF-κBp65磷酸化及NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1蛋白表达水平(P <0.05)。结论:原花青素可以抑制LPS/ATP诱导的BV2细胞炎症因子分泌及NLRP3炎症小体激活,该作用与原花青素抑制LPS/ATP诱导条件下NF-κBp65磷酸化密切相关。

• 单位
  东南大学; 公共卫生学院