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摘要
目的通过对生理氧环境下CD133表达的研究,判断脑胶质瘤中CD133mRNA、CD133蛋白以及糖基化CD133即AC133表达与胶质瘤干细胞表型的相关性。方法将CD133阳性胶质瘤干细胞由含20%O2的大气氧环境转换至含1.5%O2的生理氧环境下培养,持续3d。实时荧光定量PCR检测CD133mRNA水平的表达,Western blot检测CD133蛋白水平的表达,流式细胞学检测细胞表面及细胞内AC133的表达,ELISA检测培养液上清中AC133的表达。结果生理氧环境下CD133阳性胶质瘤干细胞NCH421k,NCH441及NCH440细胞表面AC133的表达相对于大气氧环境均显著上调(均P<0.05),其蛋白荧光表达强度分别由(2 381.07±649.76)、(20 787.90±2 200.24)、(406.99±167.99)增加至(7 685.06±1 170.69)、(30 499.43±9 013.76)、(2 692.38±516.67)(n=3)。AC133的上调是转录水平和翻译后水平调控共同作用的结果。结论 AC133相对于CD133mRNA和蛋白更敏感地标记了胶质瘤干细胞。
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