摘要

Nebovirus(NeV)是导致犊牛腹泻的重要病原,是国内的新发病毒.VP1是NeV主要结构蛋白,在病毒的感染与免疫中发挥重要作用.以国内NeV流行毒株VP1基因序列为模板,进行密码子偏好性优化、序列合成并插入到pET28a(+)的Nde I和Xho I酶切位点间,构建了表达VP1完整编码框的pET28a-VP1-BL21(DE3)表达载体.SDS-PAGE结果显示,表达的目的蛋白大小约60 kDa,与预期相符;Western-blot结果显示该重组蛋白可以特异地与NeV抗血清反应;家兔免疫试验结果显示该重组蛋白可以刺激兔体产生特异性抗体.本试验成功表达了NeV VP1重组蛋白,具有良好的免疫原性.为进一步研究NeVVP1蛋白的功能和血清学检测方法奠定了基础.