独活寄生汤抑制NLRP3炎性小体活化治疗痛风性关节炎

作者：陶广义; 王政臻; 黄家俊; 吴迪友; 王鑫伟; 杨顺; 杨彬^*; 黄俊卿^*

来源：中国组织工程研究, 2023, 1-8.

• 独活寄生汤
• 痛风性关节炎
• PTEN诱导激酶1
• Parkin
• NLRP3

背景：研究发现NLRP3炎症小体的激活是痛风性关节炎发病的重要因素，通过调控PTEN诱导激酶1(PTEN-induced kinas 1,PINK1)/Parkin信号通路能有效抑制NLPR3炎性小体的活化。目的：探究独活寄生汤对PINK1/Parkin/NLRP3信号通路的影响。方法：(1)动物实验：将雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组(秋水仙片0.3 mg/kg)和独活寄生汤低、中、高剂量组(分别给予6.9,13.8,27.6g/kg)，除对照组外其余各组大鼠通过右后踝关节腔注射尿酸单钠盐晶体混悬液构建大鼠痛风性关节炎模型。(2)细胞实验：将人单核细胞(THP-1)分为空白对照组、模型组、独活寄生汤含药血清组、PINK1 siRNA+独活寄生汤含药血清组，除空白对照组外其余各组细胞采用尿酸钠刺激建立体外痛风性关节炎模型。(3)观察大鼠踝关节肿胀度、关节周径、步态评分、关节炎症指数和病理分级程度；酶联免疫吸附法检测尿酸、C-反应蛋白、NLRP3和白细胞介素1β水平；免疫印迹法检测PINK1/Parkin/NLRP3通路相关蛋白表达水平；四甲基偶氮唑蓝法检测细胞活性；免疫荧光双染检测线粒体自噬水平；免疫荧光检测NLRP3和白细胞介素1β表达。结果与结论：(1)与对照组比较，模型组大鼠在6-48 h的踝关节肿胀度、踝关节周径升高(P <0.05)，在24和48 h时的步态评分与关节炎症指数升高(P <0.05)，血清尿酸和C-反应蛋白水平、病理分级程度、滑膜组织中PINK1、Parkin和NLRP3蛋白表达及白细胞介素1β水平均升高(P<0.05)；与模型组比较，独活寄生汤各剂量组大鼠上述指标中除PINK1和Parkin蛋白表达升高(P<0.05)外，其他指标均降低(P<0.05)。(2)与模型组比较，独活寄生汤含药血清组细胞NLRP3活性、白细胞介素1β水平和线粒体外膜转位蛋白20(TOM20)蛋白水平降低(P <0.05)，而增殖抑制率、PINK1、Parkin和LC3B蛋白水平增加(P <0.05)；细胞线粒体自噬水平升高(P <0.05)，而NLRP3和白细胞介素1β蛋白水平降低(P <0.05)。(3)与独活寄生汤含药血清组相比，PINK1 siRNA+独活寄生汤含药血清组细胞线粒体自噬水平降低(P <0.05),NLRP3和白细胞介素1β表达水平升高(P <0.05)。(4)结果表明，独活寄生汤通过调控PINK1/Parkin信号通路抑制NLRP3炎性小体活化，进而对痛风性关节炎起到治疗作用。

• 单位
  河南中医药大学; 河南省中医院