摘要
以东北红豆杉枝叶为原料,石油醚为提取溶剂,采用超声波辅助提取紫杉宁,通过单因素试验和正交法优化提取工艺,并通过分离纯化得到了紫杉宁,另外对石油醚提取物的不同分离组分及分离纯化产物紫杉宁进行了抗肿瘤活性实验。对10 g东北红豆杉枝叶,超声波辅助提取紫杉宁的最佳工艺条件为:超声波功率168 W,提取时间50 min,料液比1∶8(g∶mL),提取温度50℃。石油醚提取物经硅胶柱、C18反相柱分离纯化得到紫杉烷类化合物,通过核磁共振(NMR)及单晶X射线衍射结构鉴定,确定该化合物为紫杉宁。石油醚提取物经硅胶柱分离得到Fr.1~Fr.7组分与Fr.4-1组分,分离纯化得到的紫杉宁抗肿瘤活性结果表明:Fr.1、Fr.3、Fr.4、Fr.5对人宫颈癌Hela细胞具有良好的抑制活性,半数抑制质量浓度(IC50)值分别为32.3、 31.9、 22.3和38.4 mg/L。紫杉宁(Fr.4-1)对人乳腺癌MCF-7细胞、人非小细胞肺癌A549细胞和人宫颈癌Hela细胞具有较好的抑制作用;其中对A549细胞抑制效果相对最好,(IC50)值为13.1 mg/L,对MCF-7细胞抑制效果其次,IC50值为17.9 mg/L,对Hela细胞也有一定的抑制作用,IC50值为35.5 mg/L。
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