应用激光捕获显微切割和蛋白质组学技术筛选鼻咽癌的差异表达蛋白质

作者：易红; 程爱兰; 黄卫国; 张鹏飞; 李茂玉; 彭芳; 李峰; 李萃; 陈主初; 肖志强

来源：中南大学学报(医学版), 2008, (05): 375-383.

DOI：10.3321/j.issn:1672-7347.2008.05.002

• 鼻咽癌
• 激光捕获显微切割技术
• 蛋白质组学
• 二维凝胶电泳
• 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
• 电喷雾电离串联质谱
• 免疫印迹
• 组织芯片

目的:筛选鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的差异表达蛋白质,为寻找NPC的分子标志物提供科学依据。方法:采用激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)分别从NPC组织和正常鼻咽上皮组织(normal nasopharyngeal epithelial tissue,NNET)中纯化NPC细胞和正常鼻咽上皮细胞(normal nasopharyngeal epithelial cells,NNEC),应用二维凝胶电泳(2-DE)分离LCM纯化细胞的蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和电喷雾电离串联质谱(ESI-Q-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点,Western印迹和组织芯片(tissue microarray,TMA)免疫组织化学验证差异蛋白鳞状细胞癌抗原1(SCCA1)在两种组织中的表达水平。结果:建立了LCM纯化的NPC细胞和NNEC的2-DE图谱,质谱鉴定了36个差异蛋白质,其中20个蛋白只在NPC表达或表达上调,16个蛋白在NPC中表达下调或缺失。Western印迹和组织芯片免疫组织化学结果显示:SCCA1在NPC中的表达水平较NNET明显下调,与比较蛋白质组学结果一致。结论:36个差异蛋白可能与NPC的发病有关,为筛选NPC分子标志物奠定了基础。

• 单位
  中南大学湘雅医院