微小RNA-26a靶向调控高迁移率族蛋白A1抑制宫颈癌细胞迁移、侵袭的研究

作者：张展^*; 王金铭; 刘月华; 李静; 王晓芳; 朱海; 王萍

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2017, 37(10): 778-784.

• 宫颈癌
• miR-26a
• 迁移
• 侵袭
• HMGA1

目的探讨宫颈癌细胞中微小RNA-26a(miR-26a)靶向调控高迁移率族蛋白A1(high mobility group protein A1, HMGA1)对细胞迁移和侵袭的影响。方法将宫颈癌细胞系HeLa细胞和SiHa细胞各分为4组(miR-26a模拟物组、模拟物对照组、miR-26a抑制物组、抑制物对照组), 利用生物信息学靶基因网站预测miR-26a与HMGA1的关系, 采用荧光素酶报告基因活性检测法验证miR-26a对HMGA1基因表达的调控作用;采用实时荧光定量PCR技术、蛋白印迹法检测各组细胞中miR-26a和HMGA1的表达, 采用体外迁移试验和体外侵袭试验检测各组细胞的迁移和侵袭能力。结果 (1)荧光素酶报告基因活性检测法显示, 含miR-26a的质粒和含HMGA1基因的重组质粒共同转染宫颈癌细胞系HeLa细胞和SiHa细胞后, 与模拟物对照组比较, 其荧光素酶活性分别下降至60.57%, 69.95%(P<0.05)。(2)实时荧光定量PCR技术显示, HeLa细胞和SiHa细胞的miR-26a模拟物组中miR-26a和HMGA1 mRNA的表达水平与模拟物对照组相比分别明显增加和降低, 抑制组中miR-26a和HMGA1 mRNA的表达水平与抑制物对照组相比分别明显降低和增加, 差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)蛋白印迹法显示, HeLa细胞和SiHa细胞的miR-26a模拟物组中HMGA1的表达水平与模拟物对照组相比分别明显降低, 抑制组中HMGA1的表达水平与抑制物对照组相比分别明显增加, 差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)体外迁移试验显示, HeLa细胞和SiHa细胞的miR-26a模拟物组中穿透基底膜细胞数与模拟物对照组相比分别明显降低, 抑制组中穿透基底膜细胞数与抑制物对照组相比分别明显增加, 差异均有统计学意义(P<0.05)。(5)体外侵袭试验显示, HeLa细胞和SiHa细胞的miR-26a模拟物组中穿透基底膜细胞数与模拟物对照组相比分别明显降低, 抑制组中穿透基底膜细胞数与抑制物对照组相比分别明显增加, 差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-26a能够通过靶向调控HMGA1的表达抑制HeLa细胞和SiHa细胞的迁移和侵袭能力, 提示miR-26a与宫颈癌发病密切相关, 可能通过调控细胞的迁移和侵袭能力参与宫颈癌的发生发展, 同时可能与宫颈癌的化疗耐药的发生有一定的关系, 为宫颈癌的防治提供了新的思路。

• 单位
  商丘医学高等专科学校; 郑州大学第三附属医院