荧光标记探针检测叶酸代谢相关SNP用于多种样本免提取方法的建立

作者：丁嘉琦; 王超; 李娜; 叶晓娟; 陈红岩^*; 卢大儒^*

来源：国际遗传学杂志, 2018, 41(04): 241-247.

• 荧光标记探针
• 叶酸代谢
• 单核苷酸多态性
• 熔解曲线分析
• 免提取样本
• MTHFR基因
• MTRR基因

目的建立叶酸代谢关键酶基因3个SNP位点的荧光标记探针多重检测方法。方法针对MTHFR基因C677T和A1298C以及MTRR基因A66G 3个SNP位点所在序列设计扩增引物和荧光标记探针。采用探针熔解曲线分析技术,通过熔解曲线Tm值区分特定位点的不同基因型。结果本研究建立的荧光标记探针多重检测方法 ,能在单管中同时对3个SNP位点的野生、突变以及杂合基因型进行清晰准确的分型。该方法在抽提DNA样本、口腔拭子以及滤纸血痕样本中均进行了优化和验证。结论成功的建立起了一种特异性强、灵敏度高、操作简便、检测结果准确稳定、通量较高、结果易判读、适用于多种临床样本类型的叶酸代谢相关SNP检测方法。可以对育龄妇女的叶酸个体化补充进行临床指导,对叶酸代谢异常所引起的多种新生儿疾病、心脑血管疾病的预防具有重要意义。

• 单位
  遗传工程国家重点实验室; 生命科学学院; 复旦大学