摘要
目的观察丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinoneⅡA sulfonate,STS)对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)诱导的心肌细胞氧化应激反应的影响及其机制。方法培养新生大鼠心肌细胞,建立AngⅡ诱导的心肌细胞氧化应激反应模型。用活性氧(reactive oxygen species,ROS)敏感的二氮荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)探针测定胞内ROS水平。酶联免疫分析法测定细胞培养物上清中8-羟脱氧鸟苷(8-OHdG)含量。以细胞存活率、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性作为反应心肌细胞损伤的指标。比色法测定还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶(NADPH oxi-dase,NOX)活性。蛋白质印迹法(Western-blot)测定NOX亚单位p47 phox表达。结果 Ang Ⅱ能显著提高心肌细胞内DCF荧光信号强度,降低细胞存活率及SOD活性,同时上调培养上清液LDH活性及MDA含量。以上氧化应激相关指标能被各浓度STS抑制。进一步研究发现,STS能抑制Ang Ⅱ上调的NADPH氧化酶活性及亚单位p47 phox表达。结论 STS可以抑制Ang Ⅱ诱导的心肌细胞氧化应激损伤反应,机制可能与下调NADPH氧化酶活性及亚单位p47 phox表达有关。
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单位华中科技大学; 同济医院; 协和医院