钛表面微米坑复合纳米管形貌对骨髓间充质干细胞内质网应激的激活及其与成骨分化的关系

作者：石梦琪; 宋文; 韩天啸; 常蓓; 张玉梅

来源：中华口腔医学杂志, 2017, 52(02): 126-131.

• 钛
• 纳米管
• 间质干细胞
• 内质网应激

目的探讨钛表面微米坑复合纳米管(micropit/nanotube topography,MNT)形貌对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMMSC)内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的激活及其与成骨分化的联系,以期为生物材料表面形貌设计提供依据。方法纯钛试件分为4组:对照组(仅抛光处理)、毒胡萝卜素组(thapsigargin,TG,细胞接种于抛光钛表面,0.1μmol/L TG处理9 h)、MNT5组和MNT20组(抛光钛经酸蚀形成微米坑后,分别用5和20 V阳极氧化处理制备纳米管)。扫描电镜观察试件表面形貌,接种BMMSC并成骨诱导7、14和21 d后,分别行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、胶原和矿化结节染色及半定量分析,透射电镜观察接种12 h后BMMSC内质网形态的变化。荧光实时定量PCR检测ERS相关基因[免疫球蛋白重链结合蛋白质(immunoglobulin heavy chain binding protein,BiP)、蛋白激酶受体样内质网激酶(protein kinase receptor like endoplasmic reticulum kinase,PERK)、转录激活因子4(activating transcription factor 4,ATF4)]的表达。结果成骨诱导后TG和MNT20组ALP分泌、胶原合成和矿化结节形成均显著高于对照组(P<0.05)。相比对照组,TG、MNT5和MNT20组BMMSC内质网腔不同程度扩张、膨胀;与对照组相比,TG组BiP、PERK、ATF4表达量(分别为1.87±0.10、2.24±0.35、1.85±0.14),MNT5组BiP、ATF4表达量(分别为1.27±0.09、1.25±0.04)和MNT20组BiP、PERK、ATF4表达量(分别为1.44±0.09、2.40±0.60、1.48±0.05)显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论钛表面微米坑复合纳米管形貌可不同程度激活BMMSC ERS,而激活的ERS可能促进了钛表面形貌诱导的成骨分化。

• 单位
  军事口腔医学国家重点实验室; 首都医科大学; 中国人民解放军第二炮兵总医院; 第四军医大学