摘要

目的 探究网膜素(omentin)在HT22神经元氧糖剥夺模型(OGD/R)中对自噬的调节作用,旨在初步明确网膜素在此模型中可能发挥的药理保护作用,为后续缺血性脑卒中治疗方案提供新思路。方法 (1)在HT22细胞上构建网膜素过表达稳转细胞株,采用Western印迹法进行转染效率验证。(2)在HT22细胞水平上构建OGD/R模型,分为正常组、OGD/R组、OGD/R+vector组、OGD/R+网膜素组,采用Western印迹法检测微管相关蛋白轻链Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)蛋白、自噬相关基因5(Atg5)、Atg7和P62蛋白表达水平。(3) Western印迹法和免疫荧光检测溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)表达量和表达位点情况。结果 在OGD/R组中,LC3Ⅱ向LC3Ⅰ转化增加,Atg5和Atg7的蛋白表达量增加,P62的蛋白表达量降低,但LAMP1的蛋白表达增加。网膜素促进了LC3Ⅱ向LC3Ⅰ的进一步转化,上调Atg5和Atg7的蛋白表达量,明显抑制P62的蛋白表达量,减少了LAMP1的蛋白积累。结论 网膜素在氧糖剥夺模型中可能通过持续激活自噬,及时清除自噬底物,缓解溶酶体功能失调,从而发挥神经元保护作用。