在高糖培养条件下咖啡因诱导背根神经节细胞释放降钙素基因相关肽的研究

作者：刘亚东; 卫中庆; 张思聪; 薛珺; 卢晓明^*

来源：临床泌尿外科杂志, 2020, 35(11): 902-906.

DOI：10.13201/j.issn.1001-1420.2020.11.012

• 咖啡因
• 背根神经节细胞
• 降钙素基因相关肽

目的:证实在高糖培养条件下大鼠背根神经节细胞生长情况及咖啡因诱导大鼠背根神经节细胞释放降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)。方法:取雌性Sprague-Dawley大鼠L3-S3背根神经节细胞行不同糖浓度(25、45、50、100、200、400 mmol/L)、不同时间(24、48 h)、不同咖啡因浓度(10、50、100、500、1000、5000μmol/L)培养,CCK-8实验检测细胞活力。确定培养条件后,将大鼠背根神经节细胞分为正常对照组、高糖组(HG组)、高糖+咖啡因组(HG+caf组)三组进行培养。qRT-PCR和ELISA法分别检测各组中背根神经节细胞内CGRP的mRNA水平及上清液内蛋白含量。结果:在培养24 h,200 mmol/L和400 mmol/L糖浓度培养下大鼠背根神经节细胞的活力明显下降(P<0.01)。在培养48 h,45 mmol/L糖浓度培养下大鼠背根神经节细胞的活力明显下降(P<0.05),而45 mmol/L以上的糖浓度培养下大鼠背根神经节细胞的活力下降更明显(P<0.01)。在48 h、45 mmol/L糖浓度培养条件下,500μmol/L以上咖啡因浓度可明显降低大鼠背根神经节细胞的活力。与正常对照组相比,HG大鼠背根神经节细胞内CGRP的mRNA水平及培养上清液内CGRP蛋白含量明显降低(P<0.05);咖啡因干预后,HG+caf组(10μmol/L)与HG组相比,大鼠背根神经节细胞内CGRP的mRNA水平(P<0.05)及培养上清液内CGRP蛋白含量(P<0.01)明显增加。结论:大鼠背根神经节细胞的活力随着糖浓度、咖啡因浓度的升高而逐渐降低。咖啡因可以激活高糖培养条件下大鼠背根神经节细胞释放CGRP。

• 单位
  南京医科大学第二附属医院