多重荧光定量聚合酶链反应对呼吸道感染患儿支原体和衣原体感染的诊断价值

作者：李海华; 李静; 楼亚玲; 马志红; 钟婧; 郁峰; 戴利成

来源：国际流行病学传染病学杂志, 2017, 44(01): 27-31.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-4149.2017.01.006

• 聚合酶链反应
• 呼吸道感染
• 肺炎支原体
• 肺炎衣原体
• 沙眼衣原体

目的探讨多重荧光定量.PCR技术(TaqMan探针法)在检测呼吸道感染住院患儿中肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)和沙眼衣原体(CT)的应用价值。方法构建质粒标准品,梯度稀释后进行扩增建立标准曲线检测多重荧光定量PCR方法的扩增效率,并验证其敏感性、特异性和重复性;收集151例疑似呼吸道感染住院患儿的咽拭子样本,采用多重荧光定量PCR技术检测MP、CP和CT基因片段,其中128例样本同时进行MP-IgM和CP-IgM的血清学检测,评价该方法在临床检测中的应用价值。结果本实验中MP、CP和CT三种病原体的引物和探针的扩增效率分别达到109.20%、116.90%和112.80%,三种病原体的最低检出浓度分别为50、25和25 pg/μL,与其他已知病原体不存在交叉反应;不同批次间三种病原体的扩增Ct值的变异系数均小于3%。151份样本中,多重PCR检测出MP、CP和CT阳性率分别为23.84%(36份)、17.88%(27份)和2.65%(4份),128份样本中MPIgM阳性检出率为22.65%;CP-IgM阳性检出率为14.06%。结论多重荧光定量PCR方法可以为临床幼儿呼吸道感染病原体的早期检测提供快速可靠的辅助诊断依据。

• 单位
  湖州市中心医院; 分子医学重点实验室