小麦内质网氧化还原酶在毕赤酵母中的表达

作者：胡松青; 李旺; 陈煜; 侯轶

来源：华南理工大学学报(自然科学版), 2019, 47(08): 57-63+70.

• 小麦内质网氧化还原酶1
• 重组蛋白
• 巯基氧化
• 面粉粉质

为开发健康天然的新型酶制剂型面粉改良剂,利用毕赤酵母重组表达了小麦内质网氧化还原酶1(wEro1);将wero1基因亚克隆至毕赤酵母表达载体pPICZα A,实现了wEro1在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中的分泌表达,优化诱导表达条件后wEro1的产量可达(53.24±2.11) U/mL;应用硫酸铵沉淀和阴离子交换层析纯化了wEro1,对电泳纯wEro1进行酶学性质研究.结果表明:wEro1具有催化二硫键异构酶(PDI)的巯基氧化活性,且最适pH为7.5,最适温度为30℃;在低温和中性pH条件下,该酶具有较好的稳定性.将毕赤酵母重组wEro1添加到面粉中,考察其对面粉加工品质的影响,发现毕赤酵母重组wEro1改善面粉粉质特性的能力比大肠杆菌重组wEro1更强.

• 单位
  华南理工大学; 广东省食品工业研究所有限公司