摘要
目的观察针对乙型肝炎病毒(HBV)不同靶区发夹样RNA(shRNA)抑制HBV复制与表达的效率。方法根据shRNA表达载体设计原则,设计并构建了针对HBV P、C、S和X区7种特异性和2种序列突变的shRNA表达载体,将其与1.3倍HBV全基因表达载体共转染于HepG2细胞,通过Southern blot和酶联免疫吸附法分别检测HBV DNA复制中间体和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)水平,来观察shRNA抗HBV复制与表达的效率。结果发现针对HBV不同靶区shRNA均有抗HBV复制和表达效果,以P1、S2、C2、S1和X抑制HBV DNA复制效率较高,P1的抑制率高达95%。HBsAg表达受抑制情况与HBV DNA复制受抑制的程度相似,其中C2、C1和S2对HBsAg的抑制作用较强。结论针对HBV四个开放性读码框进行RNA干扰对HBV复制和抗原表达均有抑制作用,其中P1和C2分别对HBV复制和表达的抑制效率较高。
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单位The University of Chicago