microRNA-25通过HMGB1途径降低缺氧/复氧H9C2心肌细胞纤维化

作者：刘启方; 黄晶; 田龙海; 安亚平; 岳峰

来源：中国免疫学杂志, 2019, 35(12): 1416-1420.

• miRNA-25
• 缺氧/复氧
• 心肌纤维化

目的:探讨microRNA-25(miR-25)对缺氧/复氧诱导的H9C2细胞纤维化的作用及机制。方法:建立miR-25过表达/沉默的H9C2细胞株,行缺氧/复氧损伤处理,Real-time PCR检测miR-25的表达,Western blot检测TIMP2、MMP2、CollagenⅠ、CollagenⅢ、Fibronectin及HMGB1蛋白表达水平。构建转染HMGB1 shRNA的H9C2稳定细胞系,行缺氧/复氧损伤处理,Western blot检测HMGB1、TIMP2、MMP2、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达水平。双荧光素酶试验验证miR-25与HMGB1的靶向关系。结果:miR-25高表达组,HMGB1表达减少,TIMP2、MMP2、CollagenⅠ、CollagenⅢ、Fibronectin蛋白表达减少,细胞纤维化程度降低,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0. 01)。转染HMGB1-shRNA组H9C2细胞,缺氧/复氧处理后,HMGB1、TIMP2、MMP2、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达减少,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0. 01)。双荧光素报告基因显示,转染miR-25mimic+野生型HMGB1-3’UTR报告基因载体组荧光素酶信号强度明显下降;对照组荧光素酶没有变化,差异具有统计学意义(P<0. 05)。结论:miR-25通过靶向调控HMGB1表达降低缺氧/复氧诱导的H9C2细胞纤维化。

• 单位
  贵州省人民医院