摘要

【目的】通过培养条件的优化和适宜外植体类型的筛选,解决红松成熟胚愈伤组织诱导中存在的愈伤组织诱导率低、生长状态差、褐化率较高等问题,为建立红松成熟胚体胚发生体系奠定基础。【方法】用5种培养基类型、3种蔗糖浓度和9种植物生长调节剂组合,选择8种来源于成熟种子不同部位的外植体,对愈伤组织诱导的培养条件和适宜外植体类型进行优化和筛选。【结果】(1)在5种培养基中,DCR培养基上愈伤组织诱导率高于其他培养基、生长状态好于其他培养基;(2)添加在DCR中的3种蔗糖浓度中,35 g/L时的愈伤组织诱导率最高(92.01%)、褐化率最低(17.01%);(3)DCR添加35 g/L蔗糖情况下,9种植物生长调节剂组合中NAA 2.0 mg/L+6-BA 1.5 mg/L组合的愈伤组织诱导率最高、褐化率最低、生长状态最佳;(4)在选出的优化培养条件下,8种来源外植体中,从裸胚上切离的下胚轴的愈伤组织诱导率高、褐化率低,且增殖能力强,具备胚性愈伤组织的形态解剖特征。【结论】红松成熟胚愈伤组织诱导的优化培养条件为DCR+蔗糖35 g/L+NAA 2.0 mg/L+6-BA 1.5mg/L,适宜外植体裸胚上切离的下胚轴。