NLRP3炎症小体在富氢液减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用

作者：陈红光; 张杨; 韩焕芝; 毛幸; 田婧; 冯竞成; 谢克亮; 于泳浩^*

来源：中华麻醉学杂志, 2018, 38(10): 1241-1244.

• 氢
• 内毒素类
• 巨噬细胞
• 线粒体
• NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3

目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体在富氢液减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用。方法常规培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,采用随机数字表法随机分为4组(n=6):对照组(C组)、LPS组、富氢液+LPS组(LPS+H2组)和富氢液+LPS+ATP组(LPS+ATP+H2组)。LPS组给予浓度为1μg/ml的LPS孵育30 min。LPS+H2组和LPS+ATP+H2组同时给予浓度为1μg/ml的LPS和浓度为0.6 mmol/L的富氢液孵育30 min,然后LPS+ATP+H2组给予浓度为1 nmol/L的ATP孵育6 h。采用JC-1法测定线粒体膜电位(MMP),采用Clark氧电极法测定线粒体呼吸控制率(RCR)。采用Western blot法测定细胞NLRP3、caspase-1和凋亡相关点状蛋白(ASC)的表达。采用ELISA法检测上清液IL-1β、IL-18和IL-6的浓度。结果与C组比较,LPS组MMP和RCR降低,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度升高,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达上调(P<0.05);与LPS比较,LPS+H2组MMP和RCR升高,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度降低,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达下调(P<0.05);与LPS+H2组比较,LPS+ATP+H2组MMP和RCR升高,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度降低,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达下调(P<0.05)。结论富氢液可通过抑制NLRP3炎症小体激活,减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤。

• 单位
  德州市人民医院; 天津医科大学总医院; 天津市第四中心医院