ATP诱导免疫原性细胞死亡在肝癌免疫应答中的实验研究

作者：李然; 刘秀平; 李新; 穆晓艳^*

来源：临床和实验医学杂志, 2022, 21(21): 2241-2244.

• 肝癌
• ATP
• 免疫原性细胞死亡
• 免疫应答

目的探讨ATP诱导免疫原性细胞死亡在肝癌免疫应答中的作用及其机制。方法人肝癌细胞系HepG2购自于上海弘顺生物科技有限公司，经培养及传代后，随机分为对照组和ATP组。ATP组中采用6mmol/LATP的培养液孵育HepG2细胞24h;对照组将处于对数期HepG2细胞常规培养。CCK8实验检测HepG2细胞毒性实验;流式细胞仪检测HepG2细胞的凋亡;免疫荧光技术检测HepG2细胞的钙网蛋白膜转位;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ATP和高迁移率族蛋白1(HMGB1)含量;蛋白质印迹法检测β2微球蛋白(β2m)、TAP相关糖蛋白(TAPBP)、抗原处理相关转运体(Tap)1、Tap2和鸟苷酸腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(cGAS-STING)通路蛋白表达;Real-timePCR检测PD-L1和ICAM-1mRNA的表达。结果6mmol/L的ATP的作用下，能使HepG2细胞的抑制率达到50%;ATP组人肝癌HepG2细胞凋亡率显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比，ATP组中钙网蛋白明显发生膜转位;且ATP组中HepG2细胞释放ATP和HMGB1的表达量明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。ATP组中β2m、Tapbp、Tap1、Tap2蛋白表达明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。ATP组中PDL1mRNA表达显著低于对照组，ICAM-1mRNA表达显著高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。ATP组中cGAS和STING蛋白表达明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ATP可以通过激活cGAS-STING信号通路，诱导肝癌细胞免疫原性细胞死亡的发生，增强肝癌的免疫原性，激活抗肿瘤免疫。

• 单位
  青岛大学; 青岛市中心医院