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摘要
东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae侵染成年蜜蜂导致蜜蜂微孢子虫病。本研究旨在验证东方蜜蜂微孢子虫nce-miR-12220的存在和表达，并检测nce-miR-12220及其靶基因在病原侵染意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica (简称意蜂)工蜂过程的表达谱。Stem-loop RT-PCR和Sanger测序结果显示nce-miR-12220真实存在和表达。靶向预测结果显示nce-miR-12220共靶向KRAB-A和γ tubulin等15个基因。上述靶基因可注释到19个GO条目和3条KEGG通路。RT-qPCR结果显示，相较于接种后1 d (1 day post infection,1 dpi),nce-miR-12220在2 dpi上调表达，而在3–12 dpi阶段总体表现出显著下调表达的趋势。类似地，与1 dpi相比，靶基因KRAB-A在2 dpi上调表达，而在3–12 dpi阶段总体呈下调表达的趋势。另外，与1dpi相比，靶基因γtubulin在2–12dpi阶段总体表现出显著下调表达的趋势。上述结果表明nce-miR-12220与KRAB-A和γtubulin之间存在潜在的靶向结合和正向调控关系；东方蜜蜂微孢子虫通过下调表达nce-miR-12220抑制KRAB-A的表达进而促进增殖；意蜂工蜂可能通过抑制东方蜜蜂微孢子虫的γtubulin表达抵御病原侵染。研究结果明确了nce-miR-12220及其靶基因KRAB-A和γ tubulin在东方蜜蜂微孢子虫侵染意蜂工蜂过程中的动态表达规律，为深入探究nce-miR-12220在病原侵染中的功能及调控机制提供了理论和实验依据。
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