小鼠卵母细胞体内成熟过程中CDK1蛋白及其mRNA的动态变化

作者：孙亚婷; 贾瑶; 朱爱珍^*

来源：生殖医学杂志, 2022, 31(11): 1583-1587.

• 小鼠
• 卵母细胞成熟
• 卵细胞成熟促进因子
• 细胞周期蛋白依赖性激酶-1

目的 探讨小鼠卵母细胞体内成熟过程中细胞周期蛋白依赖性激酶-1(CDK1)蛋白和CDK1 mRNA表达的动态变化。方法 将6～8周龄SPF级ICR雌性小鼠68只随机分为4组，根据获取卵母细胞的时期分为GV组、GVBD组、MⅠ组和MⅡ组，每组17只。腹腔注射10 U孕马血清促性腺激素(PMSG)48 h后，颈椎脱臼处死法处死小鼠，获取GV期卵母细胞；注射PMSG 48 h后注射10 U人绒毛膜促性腺激素(HCG),分别于注射HCG后4 h、8 h和12 h后获取GVBD、MⅠ和MⅡ期卵母细胞。Western blot检测各阶段卵母细胞CDK1蛋白的表达，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各阶段卵母细胞中CDK1 mRNA的表达，并采用Spearman相关分析检验CDK1 mRNA和蛋白表达的相关性。结果 Western blot结果显示，CDK1蛋白在GV、GVBD、MⅠ和MⅡ期卵母细胞均有表达，且随着卵母细胞的体内成熟，CDK1蛋白表达量持续增加(P<0.05)。qRT-PCR结果显示，CDK1 mRNA在GV、GVBD、MⅠ和MⅡ期卵母细胞均有表达；与GV期比较，GVBD期和MⅠ期CDK1 mRNA表达水平均显著下调(P<0.05),而MⅡ期CDK1 mRNA表达水平显著上调(P<0.05)。Spearman相关分析显示，卵母细胞体内成熟过程中CDK1蛋白与CDK1 mRNA表达的相关性较差(R=0.200)。结论 卵母细胞体内成熟过程中CDK1蛋白的增加并不完全是由转录水平的变化引起的，其他一些机制可能在转录后水平上影响CDK1蛋白的翻译。本研究为进一步深入探讨卵母细胞成熟的分子机制奠定了一定基础。