摘要
目的研究解毒化瘀颗粒对氧化损伤人肝细胞L02的影响, 并探讨其作用机制。方法采用0.1 mmol/L H2O2干预1 h构建人肝细胞L02氧化损伤模型, 并采用不同浓度的解毒化瘀工作液(Jie-Du-Hua-Yu, JDHY)进行处理。将细胞分为5组:正常组、H2O2组、H2O2 + JDHY(0.5 mg/ml)组、H2O2 + JDHY (1 mg/ml)组、H2O2 + JDHY (1.5 mg/ml)组。MTT检测细胞活性, 透射电镜观察细胞线粒体形态, 生物化学检测细胞内超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、丙二醛、还原型谷胱甘肽和白蛋白水平, 蛋白质印迹检测细胞内兔抗磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、AKT、mTOR表达水平。多组间比较采用单因素方差分析, 两两比较采用LSD法。结果与正常组比较, H2O2组细胞增殖活性显著降低(P < 0.05), 细胞线粒体空泡化, 超氧化物歧化酶活性、白蛋白、还原型谷胱甘肽含量以及PI3K、AKT、mTOR蛋白表达水平均显著降低(P值均< 0.05), 而丙二醛含量和丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶及乳酸脱氢酶活性显著升高(P值均< 0.05)。与H2O2组比较, H2O2 + JDHY (1 mg/ml)组和H2O2 + JDHY (1.5 mg/ml)组细胞增殖活性显著升高(P值均< 0.05), 线粒体形态变化得到缓解, 超氧化物歧化酶活性、白蛋白、还原型谷胱甘肽含量以及PI3K、AKT、mTOR蛋白表达水平均显著升高(P值均< 0.05), 丙二醛含量和丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶及乳酸脱氢酶活性显著降低(P值均< 0.05)。结论解毒化瘀颗粒可有效改善肝细胞氧化应激与线粒体受损, 其作用可能与促进PI3K/AKT/mTOR信号通路表达有关。
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单位湖南中医药大学第一附属医院; 广西中医药大学第一附属医院; 湖南中医药大学