hnRNP B_1对人肺癌A549细胞DNA-PK活性及细胞周期、凋亡的影响

作者：韩娟; 李为民; 唐凤鸣; 蒲丹; 陈文彬

来源：四川大学学报（医学版）, 2008, (05): 815-818.

• DNA依赖蛋白激酶
• 核内不均一核糖核蛋白B1
• 肺癌细胞A549

目的探讨核内不均一核糖核蛋白B1(heterogeneous nuclear ribonucleprotein B1,hnRNP B1)对肺癌细胞抑癌基因DNA依赖蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)的活性、细胞周期和凋亡的影响。方法根据干扰hnRNP B1基因序列的两段不同靶序列构建2个hnRNP B1的siRNA抑制表达质粒A、D,转染人肺癌A549细胞。实验分组为重组质粒A、D转染的A549细胞、空质粒转染的A549细胞、未转染的A549细胞、预先用DNA-PK抑制剂NU7026(10μmol/L)作用1h的重组质粒A、D转染的A549细胞。Western blot检测各组细胞hnRNP B1表达。采用DNA-PK检测试剂盒检测DNA-PKcs激酶活性。以流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果hnRNP B1 siRNA抑制肺癌细胞hnRNP B1表达;转染hnRNP B1 siRNA细胞的DNA-PK活性、凋亡率较未转染组明显增高(P均<0.05);G1期细胞明显增多(P<0.05),S期细胞减少(P<0.05)。预先用NU7026处理的转染hnRNP B1 siRNA细胞组与未处理的转染组比较,其G1期细胞明显降低(P<0.05),S期细胞明显增多(P<0.05),凋亡率明显降低(P<0.05);DNA-PK酶活性和细胞凋亡率成明显的正相关(相关系数r=0.817,P<0.01)。结论hnRNP B1可以使DNA-PK酶活性降低,从而影响细胞基因组的稳定及参与调控肺癌细胞周期与凋亡。

• 单位
  四川大学华西医院