鲍曼不动杆菌分泌物对铜绿假单胞菌及其生物膜的作用

作者：谭芮辰; 佘鹏飞; 陈丽华; 王妍乐; 伍勇

来源：临床检验杂志, 2017, 35(04): 250-253.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2017.04.03

• 鲍曼不动杆菌
• 铜绿假单胞菌
• 生物膜
• 培养上清液

目的探讨鲍曼不动杆菌培养上清对铜绿假单胞菌的浮游菌生长及生物膜形成的影响。方法收集鲍曼不动杆菌标准菌株(ATCC 19606和ATCC 1195)和临床菌株(AB23、AB39和AB53),提取6、12、16、24和48 h培养上清液。利用96孔板结合结晶紫染色法检测其培养上清液对铜绿假单胞菌标准菌株PAO1及其生物膜形成的影响;配制2×LB培养基,排除营养消耗对铜绿假单胞菌的影响;并进一步利用相对分子质量3 000蛋白质浓缩管对其培养上清液进行分离浓缩,初步探讨鲍曼不动杆菌培养上清液中有效成分的相对分子质量。结果 1224 h内的鲍曼不动杆菌培养上清液,抑制铜绿假单胞菌增殖的效果最为显著,为便于操作,本实验采用16 h培养上清液进行后续实验。50%ATCC 1195和ATCC 19606培养上清液能显著抑制铜绿假单胞菌标准菌株PAO1浮游菌的增殖,可分别使其630 nm处的吸光度从0.688±0.014和0.692±0.014减少至0.431±0.023和0.428±0.020(t=16.780,P<0.05;t=18.500,P<0.05);且50%ATCC 1195和ATCC 19606培养上清液能显著抑制铜绿假单胞菌PAO1生物膜的形成,可使生物膜的形成量(A570 nm)从2.071±0.068和1.986±0.023减少至1.639±0.042和1.525±0.202(t=9.358,P<0.05;t=3.924,P<0.05);此外,与50%鲍曼不动杆菌培养上清液组相比,培养上清液中相对分子质量<3 000的成分抑制作用显著,可使生物膜的形成量从1.177±0.040减少至1.056±0.030(t=4.192,P<0.05),而>3 000的成分并无抑制作用。结论鲍曼不动杆菌分泌物能有效抑制铜绿假单胞菌浮游菌的增殖和生物膜的形成,其有效蛋白质成分相对分子质量<3 000。

• 单位
  中南大学湘雅三医院