血红素结合蛋白通过上调HO-1表达促进EPCs分化以修复血管内皮损伤

作者：杨永妍; 董贝贝; 王国林; 于泳浩

来源：中华神经医学杂志, 2017, 16(08): 766-771.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2017.08.002

• 血红素结合蛋白
• 血红素氧合酶-1
• 内皮祖细胞

目的探讨血红素结合蛋白(HPX)是否通过上调血红素氧合酶-1(HO-1)的表达,促进内皮祖细胞(EPCs)分化和新生血管形成,以修复游离血红素引起的血管内皮损伤。方法从大鼠骨髓提取EPCs,培养鉴定后将处于对数生长期的细胞分为5组:对照组、HPX组、血红素组、血红素+HPX组、锌原卟啉Ⅸ组。对照组以全培养基(M199培养基+10%胎牛血清+5μg/mL碱性成纤维细胞生长因子+1%青链霉素混合液)培养,HPX组、血红素组、血红素+HPX组、锌原卟啉Ⅸ组在此基础上分别加入20μmol/L HPX、20μmol/L血红素、20μmol/L血红素-HPX复合物、20μmoI/L血红素-HPX复合物+10μmol/L锌原卟啉Ⅸ。各组细胞培养24 h后采用Western blotting检测细胞内HO-1蛋白含量;采用CD31、血管性血友病因子(vWF)免疫荧光共染检测EPCs表型及向成熟内皮细胞分化程度;采用体外血管形成实验测定EPCs成血管能力。结果与对照组(0.60±0.15)相比,血红素组HO-1蛋白含量(1.07±0.03)明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与血红素组相比,血红素+HPX组HO-1蛋白含量(1.57±0.06)明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,血红素组EPCs数量减少,表面CD31、vWF表达较少,免疫荧光较弱;血红素+HPX组EPCs数量较多,表面CD31、vWF表达增加,免疫荧光较强。与对照组[(41.0±7.18)个/视野]相比,血红素组形成的管腔样结构(TLS)数目[(25.0±3.67)个/视野]较少,差异有统计学意义(P<0.05)。与血红素组相比,血红素+HPX组形成较多明显的TLS[(58.6±2.70)个/视野],差异有统计学意义(P<0.05)。结论HPX可通过上调HO-1表达,促进EPCs向成熟内皮细胞分化的程度,促进新生血管形成,修复游离血红素引起的血管内皮损伤。

• 单位
  天津医科大学总医院