鼠疫耶尔森菌小肽基因sORF34缺失株毒力及短期免疫保护效果评价

作者：郭晓; 曹诗洋; 谭亚芳; 周亚洲; 陈红艳; 任一帆; 王艳; 杨瑞馥; 杜宗敏^*

来源：中国人兽共患病学报, 2022, 38(09): 757-763.

• 鼠疫耶尔森菌
• 小肽
• 毒力
• 疫苗

目的 探索小肽基因34(sORF34)缺失对鼠疫耶尔森菌毒力影响，并评价sORF34缺失株免疫保护活性。方法基于鼠疫耶尔森菌201株和鼠疫耶尔森菌EV76疫苗株利用λ-Red一步法构建小肽基因缺失株。比较鼠疫小肽基因缺失株和亲本株之间的毒力差别，并采用皮下免疫方式对小鼠进行免疫，与EV76疫苗株比较，评价体液免疫、保护率等方面的差异。结果 PCR扩增结果证实，小肽基因缺失株构建成功。通过皮下LD50测定、生存曲线测定，表明小肽基因缺失株较亲本株毒力下降。鼠疫201ΔsORF34和EV76ΔsORF34皮下免疫后可刺激机体产生抗F1-IgG,其中鼠疫201ΔsORF34免疫组抗体滴度与EV76疫苗株免疫组差异无统计学意义(P>0.05),EV76ΔsORF34免疫组较EV76疫苗株免疫组抗体滴度低；鼠疫EV76ΔsORF34株可刺激机体产生低滴度抗LcrV-IgG,而EV76和201ΔsORF34株不能刺激机体产生抗LcrV-IgG。初免后42 d使用致死剂量鼠疫201株进行皮下攻毒和滴鼻攻毒，3组保护率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 小肽基因缺失株经皮下途径感染BALB/c小鼠的毒力下降，鼠疫EV76ΔsORF34株较EV76疫苗株残存毒力进一步下降，但保护率差异无统计学意义(P>0.05),EV76ΔsORF34株有作为鼠疫减毒活疫苗候选株的潜力。

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室