酵母双杂交系统筛选猪流行性腹泻病毒N蛋白互作的宿主蛋白

作者：王忠泽; 秦翠丽; 孔宁; 左叶雯; 王蒙; 郑浩; 童武; 李丽薇; 于海; 李智丽; 单同领; 童光志

来源：中国预防兽医学报, 2017, 39(11): 916-921.

• 猪流行性腹泻病毒
• 酵母双杂交
• N蛋白
• 蛋白互作

为了获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白与宿主细胞中的互作蛋白,本研究构建PEDV N蛋白基因的重组载体p GBKT7-N,以其作为诱饵质粒,采用酵母双杂交方法,从猪肺泡巨噬细胞(PAM)cDNA文库中筛选出与N蛋白相互作用的蛋白。结果表明,诱饵蛋白在酵母双杂交系统中不存在毒性和自激活作用,而且筛选出6种与N蛋白互作的蛋白,分别为FTH1、LGALS3、CORO1C、SNRPG、KRTAP5-3和ZNF598。其中半乳糖凝集素3(LGALS3)和小核糖蛋白G(SNRPG)通过回返试验和免疫共沉淀试验证实其与PEDV的N蛋白存在特异性相互作用。本研究为进一步研究PEDVN蛋白的功能及病毒的致病机制奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 河南科技大学