液相色谱-串联质谱法快速检测干血点样品中尿酸

作者：李广林; 韩吉春; 王小臣; 赵雅君; 骆亦奇

来源：质谱学报, 2018, 39(02): 250-256.

• 液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)
• 干血点
• 自动液体操作平台
• 尿酸

建立了一种高通量液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测干血点(DBS)样品中尿酸(UA)的方法。采用自动液体操作平台对样品进行高通量自动化前处理,首先用含有UA-1,3-15 N2稳定同位素内标的Tris水溶液进行萃取,然后用含有0.1%甲酸、0.05%三氟乙酸的乙腈溶液沉淀蛋白质。处理后的样品经CN色谱柱分离,多反应监测(MRM)模式进行LC-MS/MS分析。结果表明,在DBS样品中,UA在7.81 000μmol/L浓度范围内的线性关系良好(R2=0.999);检出限为3.1μmol/L(S/N=3);定量限为12.5μmol/L(S/N=10);平均回收率为95%101%;日内相对标准偏差(RSD)为4.2%12%;日间RSD为5.3%14%。以样品中UA检测结果的总体RSD不超过15%来考察样品稳定性,分别将样品在-20℃保持30天、在37℃保持7天、反复冻融5次,样品中UA检测结果总体RSD小于10%,表明样品稳定性良好。将该方法与传统生化分析方法相比较,并分析了204份血样,相关性较好(R2=0.946)。此方法可为有限采血条件下UA的检测及UA相关疾病的大规模筛查提供新途径。