HLA-DR1二聚体的构建及其在昆虫细胞中的表达和纯化

作者：宋银宏; 刘燕; 牛力; 翁秀芳; 孙伟; 于倩; 吴雄文

来源：华中科技大学学报(医学版), 2010, (03): 305-310.

DOI：10.3870/j.issn.1672-0741.2010.03.005

• HLA-DR1
• 二聚体
• 杆状病毒载体
• 昆虫细胞
• 基因表达 HLA-DR1
• dimer
• baculovirus vector
• insect cell
• gene expression

目的构建HLA-DR1(由DRA和DRB1*01基因编码)杆状病毒表达载体,并使其在昆虫细胞内得到表达。方法采用RT-PCR方法从721.221细胞中扩增DRα和DRβ的信号肽及胞外序列,运用重叠PCR将DRα和DRβ片段分别与Fos和Jun的亮氨酸拉链序列相连,成为DRα-Fos和DRβ-Jun,DRα和DRβ可凭借Fos和Jun的亮氨酸拉链结合形成DR1分子,再通过EcoRⅠ酶切位点将DRα-Fos和人IgG1的Fc段相连,形成DRα-Fos-Fc重组序列,2个同源的DR1分子可通过IgG1的Fc段的二硫键结合形成二聚体。分别将DRα-Fos-Fc及DRβ-Jun插入杆状病毒表达载体pFa...

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 基础医学院; 九江学院