强力霉素调控表达脑啡肽的永生化大鼠星形胶质细胞株的构建

作者：徐颖; 田玉科; 田学愎; 梅伟; 安珂; 杨辉

来源：中华麻醉学杂志, 2006, (06): 534-537.

DOI：10.3760/j.issn:0254-1416.2006.06.022

• 脑啡肽类
• 多西环素
• 基因表达调控
• 星形细胞 Enkephalins
• Doxycycline
• Gene expression regulation
• Astrocytes

目的构建受强力霉素(Dox)调控表达脑啡肽的永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST)。方法采用脂质体介导法将重组质粒pRevTREhPPE和调节质粒pRevTet-On分别转染逆转录病毒包装细胞PT67；将含有RevTet-On和RevTRE/hPPE病毒上清感染LAST,得到稳定表达脑啡肽的IAST/Tet-On/ hPPE细胞株,实时定量PCR检测Dox定量调控该细胞株前脑啡肽原(hPPE)基因的表达,免疫细胞化学及放射免疫分析法检测Dox定量调控该细胞株中脑啡肽的表达。结果IAST/Tet-On/hPPE细胞株中,hPPE基因的表达和脑啡肽的分泌受Dox调控,Dox浓度为100～5000 n...

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院; 中山大学附属第一医院