急性心肌梗死早期诊断中血浆microRNAs的标准化检测及临床意义

作者：辛金海; 姚春霞; 丁敏; 李小坤; 王如美; 时志民

来源：现代中西医结合杂志, 2017, 26(09): 974-976.

• 急性心肌梗死
• microRNA
• miR-208a
• miR-499

目的建立急性心肌梗死早期诊断的血浆microRNAs检测平台及其定量分析的标准化流程,筛选可作为急性心肌梗死早期诊断潜在标志物的血浆microRNAs。方法分别收集30例健康者和50例急性心肌梗死患者的血浆,以肝素、EDTA或枸橼酸钠抗凝,常规法或Trizol改良法提取血浆中的RNA,加入外源性线虫microRNA(celmiR-39)作为标准内参,采用两种qRT-PCR技术(Taq Man探针法和SYBR Green法)分别检测候选microRNAs的表达量,评价其早期诊断急性心肌梗死的临床价值。结果与EDTA相比,肝素对血浆候选microRNAs的qRT-PCR检测存在明显抑制作用(P<0.05);与常规法相比,改良法可明显降低Taq Man探针法检测候选microRNAs的Ct值(P均<0.05);急性心肌梗死患者血浆miR-1,miR-133b,miR-208a,miR-499的平均表达水平均显著高于对照组(P均<0.05),其中miR-208a和miR-499在胸痛发作2 h内即明显升高,二者可作为急性心肌梗死早期诊断的标记物;miR-208a和miR-499联合检测阳性率明显高于单一检测(P<0.05)。结论肝素对血浆microRNAs的检测有抑制作用;Trizol改良法提取血浆microRNAs能有效提高其检出水平;Taq Man探针法对血浆微量microRNAs检测的灵敏度和特异度高于SYBR Green法;联合检测血浆miR-208a和miR-499的表达较单一检测对急性心肌梗死的早期诊断准确率高。

• 单位
  邯郸市第一医院; 河北工程大学