地黄多糖对过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用

作者：罗丽丹; 李达佑; 钟华; 曹玲英; 刘婷婷

来源：眼科新进展, 2022, 42(08): 612-616.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2022.0125

• 地黄多糖
• 过氧化氢
• 人晶状体上皮细胞
• NOD样受体蛋白3/caspase-1通路
• 细胞焦亡

目的 探讨地黄多糖对过氧化氢(H2O2)诱导的人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化损伤的保护作用及机制。方法 取对数生长期的B-3细胞(HLEC)作为研究对象。筛选H2O2和地黄多糖最佳作用浓度。依据筛选的地黄多糖抑制H2O2致B-3细胞损伤的最佳作用浓度处理细胞，将B-3细胞分为：空白组、H2O2组和地黄多糖组。空白组：用10 g·L-1羧甲基纤维素钠预处理细胞24 h后，换为EMEM培养基培养24 h; H2O2组：用10 g·L-1羧甲基纤维素钠预处理细胞24 h后，换为含100 mol·L-1 H2O2的EMEM培养基培养24 h;地黄多糖组：用含40 mg·L-1地黄多糖的培养基预处理细胞24 h后，换为含100 mol·L-1 H2O2的EMEM培养基培养24 h。采用扫描电镜和免疫荧光染色观察细胞焦亡情况；测定细胞活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量及培养液中白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平；Western blot检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)/caspase-1途径相关蛋白表达水平。结果 100 mol·L-1 H2O2和40 mg·L-1地黄多糖为最佳作用浓度。扫描电镜结果显示：空白组细胞呈圆球形，边界规则；H2O2组细胞肿胀变大，边界不规则；地黄多糖组细胞肿胀程度减轻。与H2O2组相比，地黄多糖组切割消皮素D(GSDMD)-N阳性细胞数为每视野(5.33±0.46)个，GSDMD-N阳性细胞数显著减少(P<0.05)。与H2O2组相比，地黄多糖组B-3细胞ROS水平、MDA含量显著降低(均为P<0.05)。与H2O2组相比，地黄多糖组培养液中IL-1β、IL-18含量降低(q=20.694、11.618,均为P<0.05)。与H2O2组相比，地黄多糖组B-3细胞NLRP3蛋白表达水平及caspase-1/pro-caspase-1、GSDMD-N/GSDMD均降低(均为P<0.05)。结论 地黄多糖可减轻H2O2作用下B-3细胞的氧化损伤，其作用机制与抑制细胞焦亡有关。

• 单位
  梅州市人民医院; 中心实验室