蔗糖异构酶基因在Escherichia coli BL21(DE3)中的表达及重组菌的细胞固定化

作者：任贲; 李莎; 徐虹; 蔡恒

来源：食品与发酵工业, 2010, (06): 1-6.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2010.06.002

• 蔗糖异构酶(SIase)
• 乳糖诱导
• 蛋白表达
• IPTG
• 固定化 sucrose isomerase(SIase)
• lactose induction
• protein expression
• immobilization

分别利用IPTG和乳糖两种诱导物诱导蔗糖异构酶(SIase)基因在E.coliBL21(DE3)中实现表达,对诱导温度、诱导时机、诱导物浓度、诱导持续时间进行比较分析并优化,确定了二者的最佳诱导条件,在E.coli培养3h后(OD600约为0.9)添加终浓度为0.8mmol/L的IPTG(0.5mmol/L乳糖)在20℃(24℃)条件下诱导14h(12h)能获得最高的蛋白表达量及SIase酶活。在最优条件下以IPTG为诱导物时目的蛋白占总蛋白的41.6%,单位体积培养液中SIase酶活为12.37U/mL,以乳糖为诱导物时分别为27.2%,14.72U/mL,从收获酶活角度考虑可见乳糖作为诱导...

• 单位
  南京工业大学; 材料化学工程国家重点实验室