骨髓特异性高表达neuritin转基因小鼠的构建

作者：刘远志; 周吉银; 张祚; 李和教; 黄毅岚

来源：实用医学杂志, 2018, 34(10): 1624-1632.

DOI：10.3969/j.issn.1006-5725.2018.10.011

• Neuritin基因
• 转基因小鼠
• Lyz-Cre
• Cre-Loxp系统
• 基因型鉴定

目的构建骨髓特异性高表达neuritin转基因小鼠并进行繁殖、基因型鉴定,为进一步研究neuritin蛋白治疗外周神经病变奠定基础。方法将2对转基因小鼠loxp-stop-loxp-neuritin与转基因小鼠lyz-Cre/+进行饲养和繁殖,对其子鼠提取尾组织DNA,采用PCR方法鉴定小鼠基因型,获取基因型neuritinloxp/+lyz-Cre/+即为骨髓特异性高表达neuritin小鼠。选择C57BL/6j野生型小鼠作为对照,并通过组织免疫荧光检测小鼠骨髓neuritin的表达量,进一步验证neuritin loxp/+lyz-Cre/+小鼠的准确性。结果 2种转基因纯合子小鼠均有繁殖能力,相互杂交其子鼠基因型为neuritin loxp/+lyz-Cre/+、neuritin loxp/-lyz-Cre/+、neuritin loxp/+lyz-Cre/-、neuritin loxp/-lyz-Cre/-,其繁殖结果基本符合孟德尔遗传定律。免疫荧光结果显示:neuritin loxp/+lyz-Cre/+小鼠骨髓neuritin表达量显著高于野生型小鼠(P<0.05)。结论 PCR是小鼠基因型鉴定的可靠方法。雄性lyz-Cre/+小鼠与雌性neuritin loxp/+小鼠交配是获得neuritin loxp/+lyz-Cre/+小鼠的有效途径。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 西南医科大学