LASP1与MTDH互相调控介导121例人脑胶质瘤组织及细胞株异常增殖探讨

作者：罗穆云; 肖秋香^*; 廖伟; 易仁辉; 李伟松; 刘四君

来源：中华肿瘤防治杂志, 2021, 28(01): 31-41.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2021.01.05

• LASP1
• MTDH
• 胶质瘤
• miR-203a-3p
• 核转录因子κB

目的探讨LASP1和MTDH互相调控介导人脑胶质瘤异常增殖的分子机制。方法收集赣南医学院第一附属医院2013-05-19-2018-03-21首诊并进行手术治疗的121例脑胶质瘤患者瘤组织及其癌旁正常脑组织,使用定量聚合酶链式反应(qPCR)、蛋白质印迹法和免疫组化法检测LASP1和MTDH表达。构建4个实验组,采用U251细胞株进行转染。第1组转染pcDNA-LASP1与pshRNA-MTDH,第2组转染pshRNA-LASP1与pcDNA-MTDH,第3组转染pshRNA-LASP1与pshRNA-MTDH,第4组转染无意义序列。采用qPCR和蛋白质印迹法测量4组LASP1、MTDH、miR-203a-3p、Brk1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9的表达,使用甲基化PCR测量甲基化MTDH的表达,通过克隆形成、划痕愈合和Transwell试验检测4组细胞增殖、迁移和侵袭能力。对U251细胞株使用不同浓度PDTC与PMA培养后,通过qPCR和蛋白质印迹法检测LASP1和MTDH的表达。2组间均值比较用t检验,多组均值间比较用单因素方差分析,两两多重比较用LSD检验;2组间率的比较则采用χ~2检验;双定量变量相关用Pearson分析。结果人体组织标本测定指标LASP1和MTDH在121例胶质瘤组织中表达量分别为6.31±1.70和5.89±1.24,在正常组织中表达量分别为4.27±1.07和3.40±0.99(t=5.224,P=0.032;t=3.561,P=0.017),两者表达量与胶质瘤恶性程度正相关(r=0.535,P=0.036;r=0.610,P=0.042)。LASP1与MTDH之间呈正相关(r=0.692,P=0.041),LASP1和MTDH中任意一方表达加强时均会导致另一方表达也同步增加,反之亦然。体外细胞实验结果显示,LASP1和MTDH通过增加Brk1、MMP-2和MMP-9的表达,从而增加胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力。MTDH影响程度高于LASP1(t=4.526,P=0.035),LASP1通过调节miR-203a-3p表达从而对MTDH翻译过程进行调控(t=6.391,P=0.023),而MTDH则通过核转录因子κB信号通路对LASP1转录过程进行调节。结论 LASP1通过miR-203a-3p对MTDH翻译过程进行调控,而MTDH通过NF-κB信号通路对LASP1...

• 单位
  赣南医学院第一附属医院