基于荧光定量PCR的鳜传染性脾肾坏死病毒滴度检测方法

作者：付小哲; 李宁求; 林强; 石存斌; 吴淑勤

来源：水产学报, 2014, 38(09): 1573-1578.

• 鳜
• 传染性脾肾坏死病毒
• 疫苗
• 滴度
• 定量PCR

针对传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)的ORF007基因,设计特异性引物及TaqMan探针,建立了ISKNV的实时荧光定量PCR方法。采用CPE法对连续10倍稀释的ISKNV培养液的滴度进行了测定,同时采用荧光定量PCR法测定病毒拷贝数。结果显示,荧光定量PCR测定的病毒拷贝数与CPE法测定的病毒滴度具有良好的线性关系,其线性方程为y=1.076x+0.545(R2=0.998 6),其中y为基因组拷贝数浓度的对数,x为病毒滴度TCID50的对数。研究表明,荧光定量PCR法可替代CPE法应用于ISKNV疫苗抗原的定量,大大缩短了疫苗制备的时间,为疫苗生产提供了方便。

• 单位
  中国水产科学研究院珠江水产研究所; 农业部