摘要
目的探讨沉默CHD1L基因对肝内胆管细胞癌(ICC)细胞系增殖和侵袭的影响。方法采用Western blot和q RT-PCR法检测三种ICC细胞系(RBE、HCCC-9810、HUCCT1)中CHD1L蛋白和mRNA的表达;选择CHD1L高表达的ICC细胞系,将CHD1L-RNAi转染该细胞后,用Western blot法筛选出干扰效果最好的CHD1L-RNAi;应用CCK-8法、平板克隆集落形成实验、细胞划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验检测转染CHD1L-RNAi后细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果 CHD1L蛋白和mRNA水平在RBE细胞系中明显高于HCCC-9810和HUCCT1细胞系(P=0.003,P=0.012和P=0.008,P=0.015);CHD1L-RNAi1的干扰效果明显优于CHD1L-RNAi2和CHD1L-RNAi3(P=0.003,P=0.008);干扰CHD1L的表达,结果显示CHD1L-RNAi1组的增殖率、集落形成数、迁移率和穿膜的细胞数明显低于未处理组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论干扰CHD1L基因能有效抑制RBE细胞系的增殖、迁移及侵袭能力。
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单位江西省分子医学重点实验室; 南昌大学第二附属医院