摘要

目的探讨人类瘦素(hLEP)基因3′非翻译区(3′-UTR)对基因表达的影响,为调控瘦素(LEP)的表达提供分子生物学依据。方法应用生物信息学软件预测hLEP基因3′-UTR中潜在的miRNA结合位点;通过基因重组构建含有hLEP基因3′-UTR的荧光素酶报告载体pGL3-LEP,在人肝癌HepG2细胞中通过瞬时转染法观察报告基因的表达变化,并应用化学发光法检测荧光素酶的活性。结果预测到hLEP基因3′-UTR中含有miR-296的结合位点,通过过表达miR-296观察到含有hLEP 3′-UTR的报告基因表达被抑制,与阴性对照组比较,miR-296使含有hLEP基因3′-UTR片段的报告载体pGL3-LEP荧光素酶的活性下降50%(P<0.05),其荧光素酶活性显著高于不含有该片段的对照载体(P<0.05)。结论 hLEP基因3′-UTR参与了LEP的表达调控。