猪流行性腹泻病毒环介导等温扩增检测方法的建立及应用

作者：罗亚坤; 梁琳; 王静; 刘存; 刘琪; 刘畅; 蔺文成; 崔尚金

来源：中国畜牧兽医, 2017, 44(02): 344-349.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.02.006

• 猪流行性腹泻病毒
• 环介导等温扩增技术
• 检测

试验旨在建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的环介导等温扩增方法(LAMP),为诊断PEDV提供简便、敏感、准确可靠的工具。参考GenBank中PEDV基因序列(登录号:KT799997),针对PEDV N基因设计了6条引物,对所建立的LAMP反应体系、反应温度进行优化,建立可特异性扩增PEDV的LAMP方法。结果显示,本试验成功建立了PEDV LAMP检测方法,在60℃恒温下反应60min,能特异性地检测PEDV,检测限量为91拷贝/μL,比常规PCR方法的敏感性高100倍。对比75份临床样本的LAMP和常规RT-PCR法检测结果,显示两种方法符合率为97.3%。综上所述,本试验建立的LAMP方法具有特异性强、敏感性高,操作简单,设备要求低的特点,适用于PEDV临床样本的快速检测。

• 单位
  华南农业大学; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 农业部