摘要
目的 检测多囊卵巢综合征(PCOS)患者和对照组血清微囊泡(MVs)的浓度与建立microRNAs (miRNAs)表达谱,分析其在PCOS发病机制中的潜在作用。方法 采集PCOS患者和年龄匹配的不孕女性的血清样本各50例。差速离心分离血清微囊泡,通过透射电子显微镜(TEM)、Western blot和纳米颗粒跟踪(NTA)分析检测其形态学特征。采用高通量测序筛选显著差异表达的miRNAs(P<0.05),并进行靶标预测以及GO/KEGG通路富集分析。通过尾静脉注射血清微囊泡,观察ICR雌性小鼠发情周期和卵巢结构变化。免疫组化方法检测卵巢PCOS炎症相关蛋白NF-κB和WNT5A的表达和定位。结果 PCOS组血清MVs浓度较高,以小直径囊泡为主。高通量测序鉴定出19种差异表达的miRNAs,其中8种上调,11种下调(P<0.05)。通过qRT-PCR鉴定5个差异表达的miRNAs,其中3条miRNAs与测序结果相同。富集分析显示可能与PCOS相关的途径包括AGE-RAGE-信号通路、MAPK信号通路和TGF-β信号通路。注射PCOS血清MVs可引起雌性ICR小鼠动情周期紊乱,且炎症相关蛋白NF-κB在细胞核中呈阳性表达。结论 PCOS患者血清中小直径MVs更丰富,差异表达的miRNAs可能参与多种PCOS相关通路。PCOS患者血清MVs可以在雌性小鼠中诱导轻度PCOS样表型。
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