黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达

作者：周晓明; 莫隽颖; 陶冶; 付水林; 宫衡

来源：化学与生物工程, 2010, (06): 50-53.

• 黑曲霉
• β-葡萄糖苷酶
• 序列分析
• 蛋白表达 Aspergillus niger
• β-glucosidase
• sequence analysis
• protein expression

根据GenBank报道的黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因序列设计两对特异性引物,分别以黑曲霉H7总RNA及基因组DNA为模板,扩增出β-葡萄糖苷酶基因bgl全长及活性中心所在的外显子5序列E5,分别将其连接到pMD18-T载体并转化到大肠杆菌DH5α测序。结果表明,bgl序列全长2583 bp,与β-葡萄糖苷酶基因(XM001398779.1)核苷酸序列同源性为99%,氨基酸序列同源性为99%,E5与bgl外显子5区域同源性为100%。进一步构建表达质粒pET32a(+)-bgl、pET32a(+)-E5、pET28a(+)-E5,转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,并进行SDS-PAGE电泳分析...

• 单位
  华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室