嵌合型口蹄疫病毒样颗粒构建、表达及鉴定

作者：刘绒欢; 郭慧琛; 杜平; 董虎; 郭梦楠; 孙世琪^*

来源：生物工程学报, 2020, 36(07): 1305-1313.

DOI：10.13345/j.cjb.190520

• 口蹄疫病毒
• 嵌合型病毒样颗粒
• OVA257-264
• VP3

为提高口蹄疫病毒(Foot-and-mouthdiseasevirus,FMDV)病毒样颗粒(Virus-likeparticles,VLPs)的特异性识别和递呈,为靶向疫苗研究奠定基础,利用反向PCR技术,将卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)第257–264位氨基酸(Amino acids,aa)的短肽嵌入FMDV结构蛋白VP3第171–172位aa或第173–174位aa,通过大肠杆菌表达FMDV结构蛋白VP0、VP1和嵌合型VP3,体外组装得到嵌合OVA257-264肽的病毒样颗粒(VLPOVA)。用动态光散射、透射电镜检测VLPOVA大小和形态,免疫印迹、酶联免疫吸附试验和激光共聚焦显微镜检测短肽的嵌入情况。结果显示在VP3的第173–174位aa嵌入OVA,不影响蛋白表达和VLPs的组装且OVA位于VLPOVA的表面,VLPOVA粒径比VLPs稍大。

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室